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一、簡介
蛋白質的測定方法，目前仍以1883年凱達爾氏(Kiedahl)發明的定氮法為(wei) 基礎，它根據各種蛋白質都具有固定比數的氮這一事實，通過對氮的測定而推算出蛋白質含量，此法所得的含氮量除了確定屬於(yu) 蛋白質組成成分的氮以外，還包括非蛋白質組成的其他有機及無機態氮，所以換算所得的蛋白質含量稱作為(wei) 粗蛋白含量，一般蛋白質中的含量為(wei) 18%，換算後即每6.25克蛋白質中含有1克氮，因此6.25成為(wei) 換算係數K，但是不同的農(nong) 產(chan) 品及其製品的實際含氮量有區別，所以不同農(nong) 產(chan) 品必須采用不同的換算係數，如花生、大豆、蠶豆、大麥、小麥、燕麥、黑麥等含氮為(wei) 17.6%，求得K=5.7，蕎麥、葵花籽、亞(ya) 麻籽、麻籽、棉花籽、蓖麻籽等換算係數則為(wei) K=5.50，玉米、菜籽為(wei) 6.00，水稻為(wei) 5.95，上述以外的其他農(nong) 產(chan) 品的換算係數均適用6.25。盡管如此，目前世界上還沒有直接分離測定含蛋白質的可行方法。因此，迄今為(wei) 止在國內(nei) 外凱氏定氮法仍然是測定蛋白質含量的經典方法。所得結果準確、穩定。
山東(dong) 盛泰儀(yi) 有限公司生產(chan) 的全自動定氮儀(yi) （蛋白質測定儀(yi) ），是引進消化吸收國內(nei) 外檢測新技術，結合我國國情，應用凱氏定氮法原理，采用化學與(yu) 物理學相結合完成的成套蛋白質含量快速測定裝置。為(wei) 糧食、食品、飼料、農(nong) 業(ye) 、商檢等檢測部門提供了理想的檢測設備。
二、操作方法 betway西汉姆APP下载廠家直供
1.試劑製備
A.硫酸(比重1.84)
B.NaOH溶液:400g NaOH 溶於(yu) 1000mlH2O中
C.2%H3BO3
D.0.1NHCL
E. 催化劑:硒+無水硫酸鈉(1:1000)或硫酸銅等
F.指示劑:0.1%甲基紅+0.5%溴甲酚綠(1:1)
2.樣品消化
稱取經粉碎通過40-60目/寸樣0.5-1克(視含氮量而定)無損地置入已洗滌烘幹的消化管中加催化劑5克左右和10ml左右硫酸。 將消化管分別放入消化架各個(ge) 孔內(nei) ，然後置於(yu) 消化爐上，然後開啟抽氣三通上自來水，使抽氣三通處於(yu) 吸氣狀態，接通電源，在加熱初始階段防止樣品飛濺。（選用電壓型控溫的消化爐起先控製在150伏左右，15分鍾左右後可滿電壓工作），（選用數顯型消化爐起先控製在200度左右，20分鍾左右後再設定所需溫度）。
3．蒸餾（結構圖上有Δ標記工作必需做）
（ST-O4A為(wei) 例）蒸餾器中，堿液及蒸餾水采用電磁泵加入，機器側(ce) 麵標簽NaOH、H2O注入接口用橡膠管套入後分別置入自備的容器中，加液時按麵板上相應開關(guan) ，液體(ti) 由泵吸入消化管內(nei) ，注入毫升數視標尺所注位置而定。（一般堿液加量是消化時硫酸用量5倍以上，加蒸餾水量15毫升左右）
1．打開電源，打開自來水，接冷卻水自來水不必開過大，出水口有水流出即可，用排水管子上夾子夾緊排水管子。
開麵板上右邊蒸氣開關(guan) 手柄往上推為(wei) 開蒸氣，同時把左邊進水開關(guan) 手柄往上推為(wei) 開，待電流表指針指在1A—2A時如果水進入側(ce) 麵蒸發爐慢，電流表長時間沒反應，請用吸合球往正麵的細長管內(nei) 吹幾下以排除管內(nei) 空氣，看示意圖指示馬上關(guan) 把左邊進水開關(guan) 手柄往下壓，壓到底壓不下為(wei) 關(guan) （盡量不要關(guan) 太慢，防止電流過大而燒壞15A保險絲(si) ），待蒸氣管噴出氣後又上推打開左進水開關(guan) 供水，2分鍾左右後電流穩定在3.5A-6A左右後，關(guan) 閉右蒸氣開關(guan) 手柄往下壓到底，壓不下為(wei) 關(guan) 。因為(wei) 紅色進水開關(guan) 是控製機器內(nei) 部產(chan) 生蒸氣的水源開關(guan) ，從(cong) 側(ce) 麵的有機玻璃窗口內(nei) 可以看到蒸發爐水位的高低，防止水位過高，因為(wei) 一開始水沒有沸騰，水不斷進入，容易使電流過大而燒壞保險絲(si) 。蒸氣開關(guan) 是起通斷蒸氣作用，也是水源進入蒸發爐和排除蒸發爐水（實驗結束時）的排水器件。（如果蒸氣出來後電流不大請開關(guan) 一下紅色蒸氣開關(guan) 會(hui) 正常。（上推為(wei) 開，下壓為(wei) 關(guan) ））
2．在250mL三角接收瓶中加入50mL2%H3BO3和2-3滴混合指示劑，蒸餾時間設定6-8分鍾，並使接收瓶托架盤往上移，使滴管浸沒在液體(ti) 中，然後按時控開關(guan) （也可不用開）。
3．向上扳動側(ce) 麵紅球手柄把消化管固定在左邊托架上，然後按麵板上開關(guan) 分別加入H2O、NaOH 液體(ti) ，然後上推蒸氣開關(guan) ，向試管內(nei) 注入蒸氣，進行蒸餾樣品，在接收瓶內(nei) 接收液達150mL左右時移下接收瓶，用蒸餾水衝(chong) 洗滴管口繼續蒸餾半分鍾，然後取下接收瓶，待滴定用，關(guan) 蒸氣開關(guan) 。第二個(ge) 樣品隻要放上後，加好液，上推蒸氣開關(guan) 既可，不要關(guan) 電源。
4．滴定.
用0.1NHCL滴定接收瓶內(nei) 的溶液，滴定溶液由綠色變成淡紫色時為(wei) 止，記下消耗HCL的毫升數，按下列式子計算蛋白含量：
蛋白含量（%）=（V-V0）N 0.014 A 100
————————————
W
式中：V----消耗HCL的毫升數
V0-----空白實驗時消耗HCL的毫升數
N----- HCL的當量濃度
0.014----1ml HCL的克當量數
A---固定係數（6.25、5.7、5.3等）
W----試樣重量g （空白測定：用0.1克糖代替樣品或不加樣品作空白測定）
4、關(guan) 機
關(guan) 電源、關(guan) 水、打開排水夾子，兩(liang) 紅球開光上推，取下消化管，擦幹淨機器。
當前位置：
